مقایسه تیتراسیون روتاویروس گاوی سویه rf و ویروس هرپس سیمپلکس نوع ۱ با دو روش پلاک و ccid۵۰%

هدف: با توجه به اینکه تیتراسیون ویروس در تعیین دوز واکسن، تهیه بذر ویروسی، تکثیر ناقل‏های ویروسی و مطالعات تکثیری دارای اهمیت است؛ بنابراین در این مطالعه تیتر ویروس هرپس سیمپلکس نوع 1 و روتاویروس با دو روش مرسوم ccid50% و پلاک به عنوان روش استاندارد مقایسه شده است. مواد و روش‏ها: سلول‏های ma104 و vero به ترتیب برای کشت روتاویروس و ویروس هرپس سیمپلکس نوع 1 تهیه و در پلیت 6 و 96 خانه‏ای پاساژ داده  شدند. بعد از تلقیح و جذب ویروس در سلول زمان بهینه بررسی آثار تخریب سلولی و نتایج محاسبه آن برای هر ویروس در دو روش ثبت شد. نتایج حاصل از دو روش برای هر ویروس به صورت جدا با هم مقایسه شد. نتایج: شروع آثار تخریب سلولی با روش ccid50% در روتاویروس در کمتر از 18 ساعت شروع و تا 72 ساعت به اوج خود می‏رسد در حالی که در hsv-1 تغییرات حاصل از تخریب سلول بعد از 24 ساعت شروع و تا 72 ساعت ادامه می یابد. در روش پلاک آثار تخریب به صورت پلاک بعد از 96 ساعت در مورد روتاویروس ظاهر و برای ویروس هرپس سیمپلکس نوع 1 این زمان حدود 72 ساعت است. در هر دو ویروس، پلاک تیتری پایین‏تر از ccid50% را نشان داد که به صورت «pfu 7/0 = 1ccid50%» گزارش می‏شود. نتیجه‏گیری: روش پلاک یکی از دقیق‏ترین روش‏ها در تعیین تیتر ویروسی است. در روش پلاک امکان جدا‏سازی یک پلاک و به‏دست آوردن ویروس خالص ژنتیکی وجود دارد. اما در ccid50% این امکان فراهم نیست. از معایب ccid50% عدم تکرار‏پذیری در نتایج تیتراسیون ویروسی نسبت به ارزیابی پلاک است.